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  • 在壓力蒸汽滅菌后殘留在管腔骨科器械中的碎片是無菌的嗎?

    發布時間:2019-02-13 02:18      

    Kenneth Smith,醫學博士,美國亞拉巴馬州阿拉巴馬大學伯明翰分校

    IbukunoluwaAraoye,外科學碩士

    譯自:AJIC 2018.9 P1009

    翻譯:美國魯沃夫(中國)培訓中心

    背景

    許多外科醫生都曾經在手術中發現空心鉆頭或鉸刀內有殘留的生物污染物。有人認為殘留的污染物在經過清洗和壓力蒸汽滅菌后為無菌,但沒有實驗依據支持這一設想。本研究的目的是確定壓力蒸汽滅菌后管腔手術器械中的生物殘留的無菌性。

    材料與方法

    研究設計

    使用15個空心鉆頭鉆取清潔的豬肩胛骨,得到留在鉆頭套管中的5-8mm長的圓柱形骨栓。在進一步處理之前,將12個鉆頭暴露于蠟狀芽孢桿菌、銅綠假單胞菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的混合物中60、120或180分鐘(每個時間段3個鉆頭)。在這12個鉆頭中選3個作為陽性對照,不進行滅菌。其余的3個鉆頭作為陰性對照,僅暴露于無菌水中。于是我們有了5個獨立的組,每組3個鉆頭(圖1)。將鉆頭進行壓力蒸汽滅菌,然后檢查細菌生長。

    圖1. 實驗方案

    污染與滅菌

    過程按照嚴格的順序進行,從第3組鉆頭(180分鐘等待時間)開始,然后是第2組鉆頭(120分鐘等待時間),第1組鉆頭(60分鐘等待時間),陽性對照鉆頭(60分鐘等待時間)和陰性對照鉆頭。

    整個過程使用無菌手套在干凈的工作空間中進行。吸移2ml細菌接種物滴入鉆頭管腔中的骨中心,讓鉆頭直立便于重力幫助細菌滲透。以這種方式污染12個鉆頭。等待時間結束后,除陽性對照外,其它鉆頭裝入滅菌紙塑袋后放入預真空壓力蒸汽滅菌器,132.2°C滅菌4分鐘,干燥40分鐘。

    滅菌后測試

    壓力蒸汽滅菌后測試所有15個鉆頭的細菌生長。使用無菌克氏針將鉆頭內腔中的骨芯抽空到15mL離心管中。然后將5mL巰基乙酸鹽肉湯無菌地通過鉆頭的中心注入同一離心管中,目的是從鉆頭的中心部分洗下殘留的骨屑。渦旋混合物后,移取100μL并涂布到TSA上進行細菌定量(第0天涂布板)。將剩余的培養基在37℃下培養5天。培養48小時后,將巰基乙酸鹽溶液劃線到TSA(48小時劃線板)上。

    每天觀察評估管和培養板的任何細菌生長。劃線接種陽性生長,通過革蘭氏染色、菌落形態和生物化學特征鑒定微生物。具有與原始實驗細菌相似的形態和生化特性的微生物送到獨立實驗室進行脈沖場凝膠電泳(PFGE)基因分型,確認它們是否確實是相同的細菌菌株。

    結果

    對照組

    所有3個陽性對照鉆頭均為原始蠟狀芽孢桿菌、MRSA和銅綠假單胞菌陽性。陰性對照組3個鉆頭中有兩個呈陽性,但陽性細菌與實驗細菌不同,可能代表最初存在的非測試細菌或收集或處理時的污染。一個鉆頭在48小時生長棒狀桿菌和凝固酶陰性葡萄球菌。

    陰性對照組中的第二個鉆頭在48小時生長凝固酶陰性葡萄球菌和芽孢桿菌物種,其形態與最初接種的蠟狀芽孢桿菌不同。PFGE后發現該芽孢桿菌菌株與接種的芽孢桿菌不同。

    實驗組

    60分鐘組中的一個鉆頭在48小時培養后出現陽性生長,呈現的過氧化氫酶陽性芽孢桿菌形態與原始接種的蠟狀芽孢桿菌不同。在整個培養期間,60分鐘實驗組中的另外2個鉆頭呈陰性。120分鐘組中的兩個鉆頭在48小時時出現芽孢桿菌屬陽性增長,形態與最初接種的蠟狀芽孢桿菌不同。PFGE證實這些芽孢桿菌屬與原始接種的蠟狀芽孢桿菌不同。120分鐘實驗組中的一個鉆頭完全陰性。

    在180分鐘組中,1個鉆頭出現芽孢桿菌屬陽性生長,其外觀和形態與原始接種的蠟狀芽孢桿菌相似的。PFGE證實該分離物與最初接種的蠟狀芽孢桿菌幾乎無異。其他2個鉆頭為陰性。

    討論

    本體外研究結果表明,標準壓力蒸汽滅菌可能無法有效殺滅管腔器械上骨組織內的所有細菌,與之前研究認為的壓力蒸汽滅菌可消除所有細菌相悖。

    我們的研究結果強調需要徹底及時清洗管腔類器械,去除管腔中殘留的生物污染物。消毒供應中心(CSSD)的工作人員應更加認識這一點。鑒于經過3小時的暴露時間后培養結果為陽性,我們建議迅速清潔嚴重污染的手術器械。一種方法是可以讓手術室人員在手術結束后去除大塊污染物并使管腔通暢,再回收器械。

    結論

    殘留的骨和其他生物污染物可能會妨礙管腔類器械的徹底滅菌,特別是在處理前等待時間很長的情況下。減少外科手術器械受污染發生率的進一步戰略應包括對CSSD和手術室工作人員的持續培訓以及對再處理方案的定期監測。

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